Меню

Методы исследования в бактериологии

Тесты квалификационные по специальности «Лабораторное дело» (2019 год) с ответами — часть 2

Общая микробиология

58. К специфическим гуморальным факторам защиты организма относят:

59. Реакцией гиперчувствительности немедленного типа является:

а) анафилаксия

б) инфекционная аллергия

в) сывороточная болезнь

г) реакция «трансплантат против хозяина»

д) формирование гранулёмы

60. Средствами иммунотерапии являются

б) сыворотки

61. Микроскопическим методом изучают свойства бактерий:

а) морфо-тинкториальные

62. Принцип деления на простые и сложные методы окраски:

а) морфология бактерий

б) способ микроскопии

в) количество используемых красителей

г) стоимость красителей

д) способ фиксации

63. Сложные методы окраски используют для изучения

а) подвижности бактерий

б) биохимических свойств бактерий

в) антигенных свойств бактерий

г) структуры микробной клетки

д) вирулентности бактерий

64. По форме микроорганизмы подразделяются на:

а) диплококки, стрептококки. стафилококки

б) бациллы, бактерии

в) палочки, кокки, микоплазмы

г) кокки, палочки, извитые

д) клостридии, бациллы

65. К извитым бактериям относятся:

г) спирохеты

66. К палочковидным бактериям относятся:

в) клостридии

67 . К шаровидным бактериям относятся:

68. Достоинства микроскопического метода диагностики инфекционных заболеваний:

а) возможность ускоренной диагностики

б) простота и доступность метода

в) при некоторых заболеваниях имеет самостоятельное диагностическое значение

г) позволяет выявить клинически значимое количество условно-патогенных микроорганизмов

д) все вышеперечисленное

69. Окраска по методу Грама зависит от:

а) морфологии бактерий

б) способа получения энергии

в) строения цитоплазматической мембраны

г) состава питательной среды

д) состава и строения клеточной стенки

70. Минимальное количество микроорганизмов в исследуемом материале, выявляемое микроскопически:

71. Клинически значимое количество условно-патогенных микроорганизмов:

д) 10 5 и более

72. Обязательные структуры бактериальной клетки (верно все, КРОМЕ):

г) цитоплазматическая мембрана

73. Клеточной стенки не имеют:

б) микоплазмы

74. Назовите метод окраски туберкулёзных палочек:

г) Циль-Нильсена

75 . Капсула бактерий:

а) органоид движения

б) обязательная структура

в) внехромосомный генетический элемент

г) фактор вирулентности

д) обладает свойствами экзотоксина

76. Жгутики бактерий:

а) участвуют в передаче генетического материала

б) состоят из белка флагеллина

в) характерны, в основном, для грамположительных бактерий

г) обязательная структура клетки

д) участвуют в спорообразовании

77. По расположению жгутиков различают бактерии (верно все, КРОМЕ):

д) подвижные

78. Споры бактерий:

а) способ размножения

б) внехромосомные факторы наследственности

в) покоящиеся репродуктивные клетки

г) эквивалент ядра у бактерий

д) образуются в процессе деления клетки

79. К спорообразующим бактериям относятся:

б) клостридии

80. Резистентность спор обусловлена (верно все, КРОМЕ ):

а) дипиколиновой кислотой

б) низкой метаболической активностью

в) наличием воды в связанном состоянии

г) тейхоевыми кислотами

д) многослойной оболочкой

81. Споры бактерий (верно все, КРОМЕ):

б) устойчивы к излучениям

в) устойчивы к дезинфектантам

г) активно метаболизируют

д) используют для контроля режима стерилизации автоклава

82. Для L – форм бактерий характерно все, КРОМЕ :

а) вызывают острые инфекции

б) вызывают хронические рецидивирующие инфекции

в) способ персистенции бактерий в организме

г) образуются под действием антибиотиков

д) вызывают слабый иммунный ответ

83. Функция капсулы бактерий:

б) антифагоцитарная

84. Система мероприятий, предупреждающих попадание микроорганизмов из окружающей среды в стерильный объект или операционную рану:

85. Методы стерилизации (верно все, КРОМЕ ):

а) кипячение

г) фильтрование через бактериальный фильтр

д) ионизирующее облучение

86. Наиболее устойчивы к дезинфектантам:

а) споры бактерий

б) микобактерии туберкулёза

в) нелипидные (мелкие) вирусы

д) вегетативные бактерии

87. Причины снижения эффективности дезинфектантов (верно всё, КРОМЕ ):

а) наличие органических загрязнений (кровь, гной, мокрота, фекалии и др.)

б) присутствие большого количества спор

в) сочетание с применением этилового спирта

г) формирование устойчивых штаммов микроорганизмов

д) нарушение технологии приготовления дезинфектанта

88. Режим стерилизации перевязочного, шовного материала, белья в автоклаве:

а) 0,5 атм. 110 0 20 мин.

б) 1 атм. 120 0 20 мин.

в) 1,5 атм. 127 0 20 мин.

г) 1,5 атм. 127 0 60 мин.

д) 2 атм. 134 0 20 мин.

89. Для контроля режима стерилизации при каждом цикле автоклавирования используют:

а) биологические индикаторы – бактериальные споры

б) время стерилизации

в) показания манометра

г) биологические индикаторы – культуры неспорообразующих бактерий

д) химические индикаторы – ИС-120, ИС-132

90. Назначение питательных сред в микробиологической практике (верно все, КРОМЕ ):

а) культивирование микроорганизмов

б) определение иммунограммы

в) изучение биохимических свойств микроорганизмов

г) сохранение музейных культур микроорганизмов

д) определение чувствительности культур к антибиотикам

91. Среды, применяемые для выделения определенных видов микроорганизмов:

в) элективные

92. Среды, позволяющие идентифицировать и дифференцировать микроорганизмы по биохимическим свойствам:

а) дифференциально-диагностические

б) среды накопления

93. Для выделения чистой культуры и ее идентификации используют:

а) бактериологический метод

в) аллергический метод

г) серологический метод

д) микроскопический метод

94. Бактериологический метод диагностики применяется для:

а) обнаружения антител в сыворотке больного

б) выделения и идентификации бактерий-возбудителей заболеваний

в) выявления антигена в исследуемом материале

г) выделения и идентификации вирусов-возбудителей заболеваний

д) выявления клеток возбудителя в исследуемом материале по его морфологическим особенностям

95. Цель бактериологического метода диагностики заболеваний:

а) обнаружение возбудителя

б) определение чувствительности возбудителя к антибиотикам

в) получение чистой культуры, ее идентификация и определение чувствительности к антибиотикам

г) определение иммунного статуса

д) определение патогенности возбудителя

96. Цель I этапа бактериологического метода:

а) получение колоний

б) посев исследуемого материала

в) микроскопия исследуемого материала

г) выделение чистой культуры

д) идентификация исследуемой культуры

97. Популяция микроорганизмов одного вида называется:

г) чистая культура

98. Цель II этапа бактериологического метода:

а) идентификация чистой культуры

б) отбор изолированных колоний

в) накопление чистой культуры

г) посев исследуемого материала

д) определение антибиотикограммы исследуемой культуры

99. Культуральные свойства бактерий:

а) морфология бактерий

б) способность воспринимать краситель

в) тип метаболизма

г) морфология колоний

д) интенсивность метаболизма

100. Клинически значимые виды микроорганизмов в основном:

101. По типу питания клинически значимые виды микроорганизмов:

г) хемогетеротрофы

д) факультативные анаэробы

102. По типу дыхания клинически значимые микроорганизмы в основном:

б) облигатные анаэробы

в) облигатные аэробы

г) факультативные анаэробы

103. Способ размножения патогенных бактерий:

б) бинарное деление

д) L -трансформация

104. Способность анаэробных микроорганизмов существовать в присутствии свободного кислорода:

б) аэротолерантность

105. Тип метаболизма облигатных анаэробов:

б) бродильный

в) окислительный, бродильный

106. Облигатные анаэробы:

в) клостридии

107. Для определения биохимических свойств микроорганизмов используют (верно все, КРОМЕ ):

а) «пестрый ряд» Гисса

в) биохимические тест-системы

г) культуры клеток ткани

д) дифференциально-диагностические среды

108. Вид – это популяция микроорганизмов сходных по (верно все, КРОМЕ ):

б) биохимической активности

в) антигенным свойствам

д) половому пути размножения

109. Фагоцитирующие клетки организма (верно все, КРОМЕ ):

б) NK -клетки

в) купферовские клетки печени

г) перитонеальные макрофаги

д) макрофаги селезенки

110. Незавершенный фагоцитоз включает в себя все стадии, КРОМЕ :

г) образование фагосомы

д) переваривание

111. Защитная роль фагоцитоза связана с:

а) гибелью поглощенных клеток

б) размножением поглощенных клеток

в) персистенцией поглощенных клеток

г) генными мутациями

112. Гуморальные неспецифические факторы защиты (верно все, КРОМЕ ):

г) нормальная микрофлора

113. Клеточные неспецифические факторы защиты:

114. Факторы неспецифической резистентности:

а) генетически детерминированы

б) не изменяются в процессе инфекционного заболевания

в) характерны в основном для мужчин

г) формируются в процессе онтогенеза

д) определяются предшествующим контактом макроорганизма с антигеном

115. Комплемент (верно все, КРОМЕ ):

б) многокомпонентная система белков

в) входит в систему гуморальной защиты

г) присутствует только в иммунном организме

д) постоянно присутствует в организме

116. Биологические функции комплемента:

а) бактерицидная

117. Активация комплемента при классическом пути инициируется:

б) антителами ( IgM , IgG )

в) комплексом антиген-антитело ( IgM , IgG )

118. Активация комплемента при альтернативном пути инициируется:

б) антителами ( IgM , IgG )

в) комплексом антиген-антитело ( IgM , IgG )

г) липополисахаридом грамотрицательных бактерий

119. Неспецифические факторы защиты организма:

г) нормальная микрофлора

д) все вышеперечисленное

120. Основной антивирусный фактор неспецифической резистентности:

д) интерфероны

121. Неспецифические факторы защиты грудного молока (верно все, КРОМЕ ):

в) лактофферин
г) SIgA
д) лактопероксидаза

122. Виды иммунитета (верно все, КРОМЕ ):

б) клеточный

123. Пассивный, искусственно приобретенный иммунитет:

г) постсывороточный

124. Пассивный, естественно приобретенный иммунитет (верно все, КРОМЕ):

а) передается с молоком матери

в) продолжительностью 6-12 месяцев

г) определяется антителами

д) определяется Т- клетками

125. IgG (верно все, КРОМЕ ):

б) образуются на высоте первичного иммунного ответа

Источник

Цель i этапа бактериологического метода тест

Бактериологический метод включает бактериоскопию материала от больного, выделение чистой культуры возбудителя и его идентификацию с определением чувствительности к антибиотикам и химиопрепаратам.

Выбор материала для исследования бактериоскопическим методом зависит от предполагаемой этиологии заболевания, стадии болезни с учетом ее патогенеза, биологических свойств возбудителя и других моментов.
1. При инфекционных болезнях, протекающих с бактериемией (брюшной тиф, генерализованные и септические формы сальмонеллеза); при сепсисе любой этиологии, вызываемом не только гноеродной кокковой микрофлорой, синегнойной палочкой, но и более редкими ее возбудителями (Serratia Salinaria, неферментирующие бактерии, анаэробы, L-формы стрептококка (метод Сукнева) и другие микроорганизмы), прибегая в этих случаях к посевам на специальные питательные среды. Следует подчеркнуть, что успех частоты и спектр выделяемых возбудителей из крови и других биологических секретов больного зависят от эрудиции, пытливости, настойчивости и упорства работников бактериологической лаборатории.
2. Спинномозговая жидкость (гнойные менингиты; туберкулезный менингит при длительном выращивании (более месяца) на специальных для выделения туберкулезных бактерий питательных средах.
3. Мокрота (острые пневмонии и трахеобронхиты, туберкулез, коклюш, чума, редкие формы брюшного тифа (пневмотиф), легионеллез, респираторный микоплазмоз и хламидиозы).
4. Слизь, гной с миндалин (стрептококковые и стафилокковые ангины).

Читайте также:  Тест Оноре де Бальзак Гобсек Что дала Анастази Гобсеку

5. Налет и слизь с миндалин, из зева и носа, отделяемое с конъюнктивы, половых органов (дифтерия).
6. Соскоб со слизистой носа (проказа).
7. Отделяемое из носа и ротоглотки (синуиты, озена, риносклерома).

серологическое исследование

8. Отечная жидкость, кусочки пораженных мышц, некрозированные ткани (анаэробные инфекции); отделяемое ран (ботулизм; в случае необходимости и столбняк).
9. Пунктат из увеличенных лимфоузлов (туберкулез, токсоплазмоз).
10 Содержимое карбункула и пунктат из нагноившихся лимфоузлов (чума, туляремия, септикопиемия, сибирская язва).

Бактериологические исследования при особо опасных инфекциях (чума, туляремия, бруцеллез, холера (при которой исследуются только испражнения(!)) выполняются в специальных режимных лабораториях, исключающих возможность самозаражения ее сотрудников при работе с бактериальными культурами и распространение возбудителей за пределы этих лабораторий.

Серологические исследования. Внедрены в клинику несколько позднее бактериологического метода, предложенного Р. Кохом. В 1896 г. Ф. Видаль обнаружил, что сыворотки крови больных брюшным тифом к концу 1-й недели болезни приобретают способность агглютинировать брюшнотифозную палочку — возбудителя брюшного тифа (положительная реакция Видаля). При полимикробной этиологии инфекционных болезней после открытия Видаля стали также прибегать к определению титров сывороточных агглютининов к выделяемым из патологического материала нескольким видам бактерий (реакция аутовидаля) и контролировать их динамику в зависимости от стадии болезни. Наиболее высокие титры агглютининов к одному из видов выделенных бактерий свидетельствуют в пользу его большей этиологической причастности к развитию болезни.

Уже в начале применения реакции Видаля в клинике было замечено, что самые тяжелые формы, например, брюшного тифа могут протекать при отсутствии в крови агглютининов (отрицательная реакции Видаля), что указывает на относительную диагностическую ценность этого метода как при брюшном тифе, так и при других инфекционных болезней. Позднее он был заменен более чувствительными серологическими методами. Но приоритетное значение открытия Видаля останется навсегда.

В настоящее время для серологической диагностики бактериальных инфекций применяют более чувствительные методы, когда антиген бактерий сорбируют на поверхности эритроцитов (эритроцитарные диагностикумы1). Таким образом, были разработаны принципиально новые серологические реакции: прямой (РПГА) и непрямой гемагглютинации (РИГА). Они широко применяются для серологической диагностики многих бактериальных, вирусных и других инфекций (брюшного тифа, сальмонеллеза, шигеллезов, бруцеллеза, туляремии и др.). Сохраняет свое диагностическое значение реакция преципитации при некоторых заболеваниях (ботулизме и сибирской язве — реакция Асколи для ее диагностики у животных). В серодиагностике особенно широко в настоящее время применяется реакция связывание комплемента (РСК), предложенная в 1901 г. французскими исследователями Борде и Жангу (сифилис, гонорея, бруцеллез, токсоплазмоз, туберкулез, проказа, сап). РСК имеет наибольшее значение для серодиагностики вирусных инфекций (грипп, другие ОРВИ, герпес, энцефалит, эпидемический паротит, орнитоз и др.), а также многочисленных риккетсиозов.

Источник

Методы исследования в бактериологии

Бактериология-это раздел микробиологии, изучающий строение, физиологию, биохимию, генетику, систематику бактерий, их распространение и роль в природе.

Различают общую, медицинскую, санитарную, сельскохозяйственную, ветеринарную, техническую (промышленную) бактериологию и т.д. Медицинская бактериология изучает бактерии — возбудителей инфекционных болезней человека (их морфологию, генетические, антигенные и другие свойства), методы и средства их выделения и определения, исследует явления иммунитета и разрабатывает средства специфической профилактики и лечения этих болезней.

К основным методам, используемым в медицинской бактериологии, относятся бактериологический (посев бактериальных культур, выделение чистых культур), серологический (исследование антигенов и антител), экспериментальный (на животных), бактериоскопия (микроскопия бактерий) и др. Санитарная бактериология изучает жизнедеятельность патогенных бактерий и сапрофитов, оказывающих влияние на среду обитания и тем самым на здоровье человека, и разрабатывает профилактические меры для ограничения их содержания и циркуляции главным образом в воде, воздухе и пищевых продуктах. Бактериология общая — раздел бактериологии, изучающий свойства бактерий вне зависимости от их принадлежности к отдельным систематическим группам. Бактериология промышленная, раздел где изучают бактерии, используемые в технологических процессах промышленного производства пищевых продуктов, витаминов, антибиотиков и прочие. Бактериология санитарная — раздел бактериологии, изучающий жизнеспособность патогенных, условно-патогенных и санитарно показательных микроорганизмов в объектах окружающей среды и разрабатывающий профилактические мероприятия для ограничения их содержания и циркуляции, главным образом в воде, воздухе и пищевых продуктах. Бактериология санитарно-пищевая—раздел санитарной бактериологии, изучающий микрофлору пищи и разрабатывающий мероприятия, направленные на повышение качества пищевых продуктов, снижение их бактериальной обсемененности и тем самым профилактику острых инфекционных болезней и пищевых токсикоинфекций.

Чтобы определить, являются ли бактерии патогенными, проводят исследование культуры различными способами. Среди них:

  1. Бактериоскопический метод.
  2. Бактериологический метод.
  3. Биологический метод.

Методика изучения бактерий делится на три этапа:

  1. Выделение бактерий из первоначальной пробы.
  2. Высевание бактерий и выращивание изучение ее свойств.
  3. Определение морфологических, биохимических, токсигенных и антигенных свойств культуры бактерий.

Для развития и размножения бактерии должны находиться в заранее подготовленных питательных средах. По консистенции они могут бытьжидкие или твердые, а по происхождению растительные или животные.

Основные требования к питательным средам:

  1. Стерильность.
  2. Максимальная прозрачность.
  3. Оптимальные показатели кислотности, активности воды и других биологических величин.

Получение изолированных колоний.

  1. Метод Дригальского. Он заключается в том , что на бактериальную петлюнаносится мазок с различными видами микроорганизмов. Этой петлей проводят по первой чашке Петри с питательной средой. Далее, не меняя петлю, методом остаточного материала проводят по второй и третьей чашкам Петри. Так, на последних образцах колонии бактерии будут засеваться не слишком плотно, тем самым упрощается возможностьнайти необходимые для работы бактерии.
  2. Метод Коха. В нем используются пробирки с расплавленной питательной средой. Туда помещается петля или пипетка с мазком бактерий, после чего содержимое пробирки выливается на специальную пластинку. Агар (или желатин) застывает через какое-то время, а в его толще легко обнаружитьнужные колонии клеток. Важно перед началом работы развести смесь бактерий в пробирках, чтобы концентрация микроорганизмов не была очень большой.

Визуально реакция бактерий на препараты можно заметить двумя практическими способами:

  1. Метод бумажных дисков.
  2. Разведение бактерий и антибиотиков в жидкостной среде.

Метод бумажных дисков требует наличие культуры микроорганизмов, которые были выращены на твердой питательной среде.На такую среду кладут несколько бумажек округлой формы, пропитанных антибиотиками. Если препарат успешно справляется с нейтрализацией бактериальных клеток, после такой обработки останется участок, лишенный колоний. Если же реакция на антибиотик отрицательная, бактерии выживут.

В случае использования жидкой питательной среды сперва готовят несколько пробирок с культурой бактерий разных степеней разведения.В эти пробирки добавляют антибиотики, и в течение суток наблюдают за процессом взаимодействия вещества и микроорганизмов. В конечном итоге получается качественная антибиотикограмма, по которой можно судить обэффективности препарата для данной культуры.

Основные задачи анализа.

Здесь перечислены по пунктам цели и этапы бактериологического метода исследования.

1. Получить исходный материал, который будет использоваться для выделения колоний бактерий.Это может быть мазок с поверхности любого предмета, слизистой оболочки или полости органа человека, анализ крови.

2. На твердой питательной среде. Через 24-48 часов на чашке Петри можно обнаружить колониибактерий разных видов. Отбираем по морфологическими/или биохимическим критериям нужный субстрат и проводим уже с ней дальнейшую работу.

3. Размножение полученной культуры. Бактериологический метод исследования может опираться на механический способ увеличения численности культуры бактерии. В первом случае ведется работа с твердыми или жидкими питательными средами, на которых в термостате размножаются бактерии и образуют новые колонии. Биологический способ требуетестественных условий увеличения численности бактерий, поэтому здесь микрорганизмамизаражается подопытное животное. Через несколько суток в пробе крови или мазке можно обнаружить множество прокариот.

4. Работа с очищенной культурой. Чтобы определить систематическое положение бактерий, а также их принадлежность к возбудителям заболеваний, необходимо провести тщательный анализ клеток по морфологическим и биохимическим призанкам. При исследовании патогенных групп микроорганизмов важно знать, насколько эффективно действие антибиотиков.

Читайте также:  Как получить сертификат Яндекса по медийной рекламе

Главное правило проведения бактериологического исследования-это максимальная стерильность. Если идет работа с пробирками, посевы и пересевы бактерий должны проводиться только нагретой спиртовкой.

Все этапы бактериологического метода исследования требуют использования специальной петли или пастеровский пипетки. Оба инструмента должны быть предварительно обработаны в пламениспиртовки. Что касается пастеровской пипетки, то тут перед термической стерилизацией необходимо отломатькончик пипетки пинцетом.

Техника посева бактерий тоже имеет свои особенности. Во-первых, при посеве на твердые среды проводят бактериальной петлей по поверхности агара. Петля уже должна иметь на поверхности образец микроорганизмов. Также практикуется посев внутрь и в этом случае петля или пипетки должны достичь дначашки Петри.

При работе с жидкими средами используются пробирки. Здесь важно следить, чтобы жидкостине касались краев лабораторной посуды или пробирки, а используемые инструменты (пипетка, петля) не дотрагивались до посторонних предметов и поверхностей.

Значение биологического метода исследования.

Анализ пробы бактерий имеет свое практическое применение.Прежде всего бактериологический метод исследования может пользоваться в медицине. Прежде всего бактериологический метод исследования может использоваться в медицине. К примеру, необходимо изучить микрофлору больного, чтобы установить правильный диагноз, а также выработать правильный ход лечения. Здесь помогает антибиотикограмма, которая покажет активность лекарственных препаратов против возбудителя заболеваний.

Анализ бактерий используется в лаборатории для определения таких опасных заболеваний, как туберкулез, возвратный тиф или гонорея. Также он применяется для изучения бактериального состава миндалин, полостей органов.

Бактериологический метод исследования можно использовать для определения загрязненности среды. По данным о количественном и качественном составе мазка с поверхности какого-либо предмета определяется степень заселенности данной среды микроорганизмами.

Источник



Ответы к тесту: Развитие и виды микроорганизмов

⚑ Закажите написание студенческой работы!

Если возникли сложности с подготовкой студенческой работы, то можно доверить её выполнение специалистами нашей компании. Мы гарантируем исполнить заказ во время и без ошибок!

Тестовый вопрос: Для выделения чистой культуры и ее идентификации используют:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] бактериологический метод

[неверно] аллергический метод

[неверно] серологический метод

[неверно] микроскопический метод

Тестовый вопрос: Бактериологический метод разработал и ввёл в микробиологическую практику :

Выберите правильный ответ:

[неверно] А. ван Левенгук

[ верно ] Р. Кох

[неверно] Л. Пастер

[неверно] З.В. Ермольева

[неверно] И.И. Мечников

Тестовый вопрос: Бактериологический метод диагностики применяется для:

Выберите правильный ответ:

[неверно] обнаружения антител в сыворотке больного

[ верно ] выделения и идентификации бактерий-возбудителей заболеваний

[неверно] выявления антигена в исследуемом материале

[неверно] выделения и идентификации вирусов-возбудителей заболеваний

Тестовый вопрос: Цель бактериологического метода диагностики заболеваний:

Выберите правильный ответ:

[неверно] обнаружение возбудителя

[неверно] определение чувствительности возбудителя к антибиотикам

[ верно ] получение чистой культуры, ее идентификация и определение чувствительности к антибиотикам

[неверно] определение иммунного статуса

[неверно] определение патогенности возбудителя

Тестовый вопрос: Исследуемый материал в бак. методе (верно все, кроме):

Выберите правильный ответ:

[ верно ] сыворотка

Тестовый вопрос: Цель I этапа бак. метода:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] получение изолированных колоний

[неверно] посев исследуемого материала

[неверно] микроскопия исследуемого материала

[неверно] выделение и накопление чистой культуры

[неверно] идентификация исследуемой культуры

Тестовый вопрос: Популяция микроорганизмов одного вида:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] чистая культура

Тестовый вопрос: Цель II этапа бак. метода:

Выберите правильный ответ:

[неверно] идентификация чистой культуры

[неверно] отбор изолированных колоний

[ верно ] накопление чистой культуры

[неверно] посев исследуемого материала

[неверно] определение антибиотикограммы исследуемой культуры

Тестовый вопрос: Культуральные свойства бактерий:

Выберите правильный ответ:

[неверно] морфология бактерий

[неверно] способность воспринимать краситель

[неверно] тип метаболизма

[ верно ] морфология колоний

[неверно] интенсивность метаболизма

Тестовый вопрос: Тип метаболизма большинства клинически значимых видов микроорганизмов:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] окислитетельный, бродильный

Тестовый вопрос: Потребность микроорганизмов в факторах роста:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] ауксотрофность

Тестовый вопрос: Клинически значимые виды микроорганизмов в основном:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] ауксотрофы

[неверно] равильный ответ: в

Тестовый вопрос: Клинически значимые виды микроорганизмов в основном:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] мезофилы

Тестовый вопрос: По типу питания клинически значимые виды микроорганизмов:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] хемогетеротрофы

[неверно] факультативные анаэробы

Тестовый вопрос: По типу дыхания клинически значимые микроорганизмы в основном:

Выберите правильный ответ:

[неверно] облигатные анаэробы

[неверно] облигатные аэробы

[ верно ] факультативные анаэробы

Тестовый вопрос: Способ размножения бактерий:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] бинарное деление

Тестовый вопрос: Бактерии наиболее биохимически активны в:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] логарифмической фазе

[неверно] стационарной фазе

[неверно] фазе отмирания

[неверно] фазе спорообразования

Тестовый вопрос: Бактерии наиболее чувствительны к антибиотикам в:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] логарифмической фазе

[неверно] стационарной фазе

[неверно] фазе отмирания

[неверно] фазе спорообразования

Тестовый вопрос: Способность анаэробных микроорганизмов существовать в присутствии свободного 02:

Выберите правильный ответ:

[ верно ] аэротолерантность

Источник

Диагностика инфекционных заболеваний

Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.

Сеть независимых лабораторий «Ситилаб» в своей работе для диагностики инфекционных заболеваний использует 3 группы специальных лабораторных методов исследования:

  • бактериологические;
  • серологические;
  • метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ДНК или РНК возбудителя инфекционного заболевания в исследуемом материале.

У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.

Бактериологические методы исследования

Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.

Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.

Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.

Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.

Для идентификации вида возбудителя гнойно-воспалительных заболеваний и определения чувствительности к антибактериальным препаратам бактериологические лаборатории используют комплекс методов. Они включают:

  • микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия) из доставленного биоматериала;
  • выращивание культуры микроорганизмов (культивирование);
  • идентификацию бактерий;
  • определение чувствительности к антимикробным препаратам и оценку результатов исследования.

Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.

Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видов микроорганизмов в биологическом материале, а также дают предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.

Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму

1 — стрептококки; 2 — стафилококки; 3 — диплобактерии Фридленда; 4 — пневмококки

Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 часов. Затем чашки Петри просматривают. Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры. Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.

Читайте также:  Тест с ответами по теме Микробиологическая диагностика туберкулеза

Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.

Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.

Идентификация — это комплекс бактериологических методов изучения бактерий, позволяющий определить вид микроорганизма. В Лаборатории «Ситилаб» идентификация большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства: на бланке результата исследования в виде наименования микроорганизма или его рода, например, Streptococcus pneumoniae (пневмококк) или Eschrichia coli (кишечная палочка).

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов, имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.

В Лаборатории «Ситилаб» определение чувствительности выделенной чистой культуры большинства видов бактерий и грибов осуществляется на автоматическом бактериологическом анализаторе с использованием диагностических панелей зарубежного производства к широкому спектру современных антибактериальных препаратов (от 6 до 32 препаратов, в зависимости от выделенного микроорганизма) с определением минимальной ингибирующей концентрации (МИК). На бланке результатов определения чувствительности к антибактериальным препаратам обозначение R указывает на резистентность, I — умеренную чувствительность, S — чувствительность микроорганизма к данному препарату.

Оценка результатов исследования. Принадлежность условно-патогенных микроорганизмов к естественной микрофлоре организма человека создает ряд трудностей при оценке их этиологической роли в развитии гнойно-воспалительных заболеваний. Условно-патогенные микроорганизмы могут представлять нормальную микрофлору исследуемых жидкостей и тканей или контаминировать их из окружающей среды. Поэтому для правильной оценки результатов бактериологических исследований необходимо знать состав естественной микрофлоры изучаемого образца. В тех случаях, когда исследуемый биоматериал в норме стерилен, как, например, спинномозговая жидкость, экссудаты, все выделенные из него микроорганизмы могут считаться возбудителями заболевания. В тех случаях, когда исследуемый материал имеет собственную микрофлору, как, например, отделяемое влагалища, кал, мокрота, нужно учитывать изменения ее качественного и количественного состава, появление несвойственных ему видов бактерий, количественную обсемененность биоматериала. Так, например, при бактериологическом исследовании мочи степень бактериурии (число бактерий в 1 мл мочи), равная и выше 10 5 , свидетельствует об инфекции мочевых путей. Более низкая степень бактериурии встречается у здоровых людей и является следствием загрязнения мочи естественной микрофлорой мочевых путей.

Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.

Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.

Серологические методы исследования

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.

1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.

С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики. При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентом в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G. При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.

2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.

Серологические исследования не обладают 100%-й чувствительностью и специфичностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.

В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.

Авидность — характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами. В ходе иммунного ответа организма на проникновение инфекционного агента стимулированный клон лимфоцитов начинает вырабатывать сначала специфические IgM-антитела, а несколько позже и специфические IgG-антитела. IgG-антитела обладают поначалу низкой авидностью, то есть достаточно слабо связывают антиген.

Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях.

Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.

Метод полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать.

Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы.

Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНК-вирусы, например, вирус гепатита С. ПЦР — это трехступенчатый процесс, повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.

В ПЦР может быть использован различный биологический материал — сыворотка или плазма крови, соскоб из уретры, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость и т.д. В первую очередь ЦПР применяют для диагностики инфекционных болезней, таких как вирусные гепатиты В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (гонорея, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная инфекции), туберкулез, ВИЧ-инфекция и т.д.

Преимущества ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими методами исследований заключаются в следующем:

  • возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организма, в том числе и материале, получаемом при биопсии;
  • возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболевания;
  • возможность количественной оценки результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);
  • высокая чувствительность метода; например, чувствительность ПЦР для выявления ДНК вируса гепатита В в крови составляет 0,001 пг/мл (приблизительно 4,0 . 10 2 копий/мл), в то время как метода гибридизации ДНК с использованием разветвленных зондов — 2,1 пг/мл (приблизительно 7,0 . 10 5 копий/мл).

Источник

Adblock
detector